簡要描述:Genaxxon我們?yōu)榭蛻籼峁┏^18年的高質(zhì)量PCR和qPCR產(chǎn)品的廣泛組合。 Genaxxon銷售 Genaxxon產(chǎn)品供應(yīng) 用于 qPCR 的不含 ROX 的 GreenMasterMix FAST
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | M3150.0200 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
GreenMasterMix FAST,不含 ROX,可在所有常見模塊系統(tǒng)中使用無探針的實(shí)時(shí)熒光定量 PCR。該預(yù)混液設(shè)計(jì)用于快速 qPCR,變性時(shí)間短,采用兩步法 PCR 方案。我們的不含 ROX 的 GreenMasterMix 包含嵌入熒光染料和進(jìn)行定量 PCR 所需的所有組分。
Genaxxon GreenMasterMix 中使用的 HotStart Taq 聚合酶的優(yōu)勢:
熱啟動技術(shù),用于在室溫下構(gòu)建。
初始變性時(shí)間短,為 2 分鐘或更短
針對 2 步法 PCR 方案進(jìn)行了優(yōu)化
無需在冰上移液
無需立即進(jìn)一步處理 (PCR)。移液式 PCR 方法可以在 RT 中放置長達(dá) 3 天。
擴(kuò)增富含 GC 的模板
高產(chǎn)
無引物二聚體形成
Genaxxon 熱啟動 Taq DNA 聚合酶具有便利性和實(shí)用性,可實(shí)現(xiàn)一致的效率和特異性:
1。它在低溫下抑制聚合酶,從而可靠地防止非特異性 PCR 反應(yīng)。因此,PCR 設(shè)置不必在冰上進(jìn)行。
2. 這意味著 PCR 方法可以在 RT(20°C 至 25°C)下混合并儲存長達(dá) 3 天,而不會影響最終結(jié)果(例如,在午休期間或等待更多樣品時(shí))。
不含 ROX 的 Green qPCR 預(yù)混液包含進(jìn)行定量 PCR 所需的所有組分,含量經(jīng)過優(yōu)化。
熱啟動 Taq DNA 聚合酶
dATP、dCTP、dGTP、dTTP
插層綠色熒光染料
優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液
穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑,可實(shí)現(xiàn)低拷貝數(shù)靶標(biāo)的擴(kuò)增
1 mL 的小等分試樣簡化了處理和儲存(每個等分試樣的凍融循環(huán)次數(shù)更少)。
特別適用于:BioRad CFX96 Touch™、CFX384 Touch™、CFX Connect™、DNA Engine Opticon® 2、Chromo4™、iCycler iQ™ 和 My iQ™、Roche LightCycler® 480、LightCycler® 1536、LightCycler® Nano、LightCycler® 96 和 QuantStudio™ 儀器、Thermo Scientific™ PikoReal™、Cepheid SmartCycler®、Bio Molecular Systems Mic qPCR 循環(huán)儀、Qiagen Rotor Gene Q、Rotor Gene 6000、MyGo Mini 和 MyGo Pro。
規(guī)格:
該實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 預(yù)混液為即用型 2 時(shí)間預(yù)混液,不含 ROX™
,適用于使用 MIC Cycler 進(jìn)行 FAST PCR
初始變性時(shí)間
短,針對 2 步法 qPCR
優(yōu)化,等分試樣大小:1 mL。
PCR 引物延伸 多重 PCR 低拷貝靶標(biāo) PCR 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
One unit is defined as the amount of enzyme which will convert 10 nmoles of dNTPs to an acid-insoluble form in 30 min at 72°C under the assay conditions (25 mM TAPS (tris-(hydroxymethyl)-methyl-amino-propanesulfonic acid, sodium salt) pH 9.3 (25°C); 50 mM KCl; 2 mM MgCl2; 1 mM b-mercaptoethanol; and activated calf thymus DNA as substrate.
eclass-Nr: 32-16-05-02
技巧
快速 PCR:
在進(jìn)行快速實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 時(shí),考慮引物設(shè)計(jì)和靶標(biāo)大小非常重要。為了在快速循環(huán)條件下進(jìn)行高效擴(kuò)增,建議靶標(biāo)大小在 70 bp 至 200 bp 之間。目標(biāo)長度越短,總運(yùn)行時(shí)間越快。對于其他靶標(biāo)和其他引物組,必須通過實(shí)驗(yàn)確定退火步驟。
請使用以下方案作為靈感,因?yàn)槟枰鶕?jù)您的目標(biāo)大小和應(yīng)用的儀器優(yōu)化儀器設(shè)置。
在 LightCycler® 96 上使用 Genaxxon 預(yù)混液(不含 ROX)快速獲得實(shí)時(shí) PCR 結(jié)果
使用 LighCycler96 (Roche) 使用快速循環(huán)實(shí)時(shí) 2 步方案對不含 ROX 的 GreenMasterMix (2X) 或不含 ROX 的 ProbeMasterMix (2X) 進(jìn)行了測試;分別為快速 PAH12 Green LC 和快速 Pthr 探針 LC。
qPCR 設(shè)置:使用 GreenMasterMix (2X)(不含 ROX)或 ProbeMasterMix (2X)(不含 ROX),靶向 PAH12 (203 bp) 或 Pthr (75 bp) 的引物和 4 種濃度的 gDNA(40 ng、20 ng、10 ng 和 5 ng)。所有 DNA 濃度均以四次重復(fù)測試。見圖 1 和圖 2。PCR 反應(yīng)混合物在 LightCycler® 96 上運(yùn)行(對 ROX 無要求)。所應(yīng)用快速方案的儀器設(shè)置、運(yùn)行時(shí)間和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);將 Fast PAH12 Green LC 和 Fast Pthr 探針 LC 與標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行比較;標(biāo)準(zhǔn) Pthr LC。見表 1.結(jié)果
:標(biāo)準(zhǔn) Fast Pthr 探針 LC 方案的運(yùn)行時(shí)間為 80.8 分鐘。快速 PAH12 綠色液相色譜和快速 Pthr 探針液相色譜方案的運(yùn)行時(shí)間分別為 47.5 和 40.8 分鐘。所有協(xié)議時(shí)間均包括 samping 時(shí)間和 15 分鐘熱啟動。如表 1 所示,F(xiàn)ast PAH12 Green LC 和 Fast Pthr Probe LC 方案的確定標(biāo)準(zhǔn)令人滿意。此外,使用不含 ROX 的 Green 2x 預(yù)混液和快速 PAH12 Green 液相色譜方案進(jìn)行的熔解曲線分析證實(shí)了高特異性。
在 -20°C 下儲存。 僅供實(shí)驗(yàn)室使用!
上海牧榮生物科技有限公司 是一家專注于分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域,以銷售為主的生物技術(shù)公司。銷售的產(chǎn)品涉及,細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備等。客戶遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗(yàn)檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。
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